期刊简介
中华医学会主办。本刊是以医学美学与美容学的基础理论研究和临床应用为重点的高级学术刊物,是面向中高级医学美学与美容学专业人员为主的学术性期刊。本刊专业领域涵盖美容外科,整形外科,美容皮肤科,美容牙科,和医学美容。刊登美容外科、美容皮肤科、美容牙科、美容内科、物理美容、药物美容、中医美容和美容护理等研究和应用。栏目有：临床论著、实验研究、医学美学、经验总结、病例报告、技术革新、综述、讲座，继续教育园地等。
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首页>中华医学美学美容杂志
- 杂志名称：中华医学美学美容杂志
- 主管单位：中华医学美容杂志；中国医学美容杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-4657/R
- 国内刊号：11-4657/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：维普收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
皮肤磨削术前后组织中KGF mRNA的表达
陈葛裙；汪治中
关键词：皮肤磨削术, 术前后, 皮肤组织, 杂交, 术后, 显影, 皮肤标本, 凝胶电泳, 角质形成细胞生长因子, 探针, 公司产品, 方法, 瘢痕, 印迹法, 中心实验室, 尼龙膜, 甲醛, 增殖和分化, 统计学分析, 人民解放军
摘要：皮肤磨削术在临床上有着较广泛的应用，但是其创面修复的机理至今尚未完全阐明。角质形成细胞生长因子(KGF)由Rubin等在1989年分离鉴定［1］，它特异性地作用于上皮细胞，促进其生长增殖和分化，因而探讨其在术后创面上皮再生过程中的作用很有意义。我们抽提了12例患者手术前后皮肤组织中的总RNA进行RNA印迹法(Northern blot)，结果如下。 一、对象和方法 1.对象：为我科住院病人，供皮区为选磨削术野中较大面积的瘢痕区域，3个月内未患任何皮肤疾患；年龄21～34岁，均为男性；痤疮瘢痕9例，水痘瘢痕2例，外伤性瘢痕1例；病程5～12年。取材方法：标本为全层皮肤，分别在术前和术后24、72、120 h 以切口为中心取全层皮肤，标本离体后立即置液氮中保存，实验前去除缝线用电子天平计重。 2.方法:①试剂：Trizol: Gibco公司产品； Agarose, Prime -α-Gene Labeling System:Promega公司产品。②人KGFcDNA探针的制备：人KGFcDNA片段由中国人民解放军烧伤中心实验室惠赠，含有人KGFcDNA全长585bp中的345bp。③方法：所有标本按文献［2］进行总RNA抽提，吸取l0 μg总RNA(约4.5 μl)，加入2.0 μl 5X甲醛凝胶电泳缓冲液、3.5 μl 37 %甲醛和10.0 μl甲酰胺，在65℃温育15 min，进行甲醛变性凝胶电泳，在20XSSC中经真空转移0.5 h至尼龙膜上，尼龙膜晾干后在80℃烘烤0.5～2h固定，用6XSSC、2XDenhardt和1 %SDS在68℃预杂交1～2 h后，将用α-32P-dATP标记的人KGFcDNA探针加入杂交管在杂交炉中68℃杂交16～24 h，用1XSSC、0.1 %SDS洗膜，再用0.1XSSC、0.1 %SDS洗膜后用X光片放射自显影，于-70℃曝光6 h～2 w。显影后用密度扫描仪分析结果。内参照探针选用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)。 3.统计学分析：实验结果采用方差分析，再行Newman-Keuls检验。 二、结果 1.12例正常皮肤标本和术后皮肤标本的总RNA经变性凝胶电泳后显示清晰的5S、28S和18S条带(图1)。 2.每份标本约10 ug总RNA用于RNA印迹法，为1例患者术前和术后1、3、5 d皮肤组织中KGF cDNA探针杂交后曝光2 w的显影，1泳道为术前组织杂交显影，2泳道为术后1 d皮肤组织杂交显影，3泳道为术后3 d皮肤组织杂交显影，4泳道为术后5 d皮肤组织杂交显影，术后3 d皮肤组织的KGF杂交条带辉度明显强于术前和术后1 d、5 d的皮肤标本(图2)。
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